回答基本環(huán)節(jié):挑選適宜的種公雞;對種公雞進行取精訓練;對種公雞進行采精。技術要點:輸精時要防止交叉感染;輸精時要將輸精管沿著輸卵管口的中央輕輕地垂直插入,同時要防止輸精管觸碰到輸卵管的側壁,以免造成輸卵管損傷;在拔出輸精管的時候滴頭不可帶有精液,若帶有精液則要重輸一遍。
一、基本環(huán)節(jié)
1、種公雞的挑選與訓練
首先挑選健康、無垂直傳播性病原(雞白痢、禽白血病等)的公雞,在正式采精前7天對公雞進行按摩訓練,將性反射強、精液品質好的公雞挑選出來。
2、采精
(1)采精前2小時停止喂料,避免采精時公雞拉出糞便,然后將保溫杯水溫調至39-40℃,精液稀釋液放入進行預熱。
(2)采用背部按摩法采精,抓雞人員左手抓住公雞雙腿,右手手臂夾住公雞,使公雞尾尖朝上45°,臀部朝向采精人員,采精人員左手大拇指和其余4指自然分開微彎曲,以掌面自公雞的腰背部向尾部輕快而有節(jié)奏地按摩1-2次,左手將尾羽撥向背側,同時用拇指和食指向勃起的交配器輕輕擠壓,右手拇指和食指迅速跨掐在泄殖腔上兩側柔軟部位并將杯口迅速放在交配器下端承接精液。
3、采精注意事項
(1)選取保溫性能好的保溫杯,保證水溫在半小時至1小時之間降低不能超過1℃,以確保精液溫度從采出到點精的階段始終保持在39-40℃之間。
(2)抓雞人員動作要輕而快,不可過于粗暴,采精人員輕撫雞背1-2次,速度適中,勿用力擠捏。
(3)避免采到透明液和氣泡,采出的精液應為乳白色,精液中不可含有血液、羽毛、糞便等污物,每只種公雞5小時候采精2-3次,采精不能過于頻繁,也不能長時間不采。
4、保存精液
在38-40℃時精子的活力比較高,在保證短時間內(nèi)輸完精液的前提下,在此溫度范圍內(nèi),溫度越高,精子活力越強,因此使水溫盡可能保持38-40℃,保證每管精液在采出后20分鐘內(nèi)用完。
5、稀釋精液
精液與自配稀釋液(配方:100ml生理鹽水、1.5ml新鮮蛋黃液、5g分析純葡萄糖、2g頭孢噻肟鈉)按照1:1的比例均勻混合,也可以購買品質較佳的商品化稀釋液,一般在稀釋過程中,用干凈的拇指堵住管口,采用“∞”式方法緩慢進行搖勻,至少重復10次左右。
6、精液品質測定
(1)精液理化指標
精液為乳白色或淺灰色略帶腥味的粘稠狀液體,以pH計或pH試紙測量,正常范圍為為7.0-7.8,各周齡種公雞精液活力等指標參考標準。
(2)精子活力檢測
①在常規(guī)顯微鏡下觀察,按0.1-1.0范圍的10級評分法估計,鮮精活力要求不低于0.5,稀釋精液活力要求不低于0.4,一般在檢查活力時要求載玻片和蓋玻片都應預熱到37℃。
②使用精子檢測分析系統(tǒng)觀察時,要進行高倍稀釋,可根據(jù)分析軟件計算程度進行100-500倍稀釋,稀釋液使用生理鹽水,檢測的活力結果以百分數(shù)出現(xiàn),要求A+B級精子數(shù)不低于20%。
(3)精子密度檢測
①血細胞計數(shù)法:首先以微量加樣器取原精液20μL,用生理鹽水稀釋10倍,其次在血細胞計數(shù)板上放1個蓋玻片,取1滴稀釋后精液置于計數(shù)板的槽中,靠虹吸作用將精液吸入計數(shù)室內(nèi),最后在高倍鏡下計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子總數(shù),將該數(shù)乘以500萬,即得原精液每毫升的精子數(shù)(精液密度)。
②精子檢測分析系統(tǒng)測定法:用微量加樣器取原精液14μl,用生理鹽水稀釋500倍,混勻,然后將稀釋精液滴于專用載玻片上,放置于分析系統(tǒng)的顯微鏡下點擊分析軟件計算視野中精子,以此方法連續(xù)計算載玻片上4角與中央5個視野,操作完畢后自動顯示精子密度等相關精液指標,一般基本原理同血細胞計數(shù)法,只是將其中的人工計數(shù)過程利用計算機捕捉精子圖像自動計算所代替。
③分光光度計法:分光光度計預熱20分鐘,選定所需波長470-570nm,根據(jù)精液對光的吸收情況,選擇合適的靈敏度,使吸光度讀數(shù)控制在0.2-0.7,輕輕旋動調“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照影響),然后將盛蒸餾水的比色皿放入比色皿座架中的第1格內(nèi),將10倍稀釋的精液放在其它格內(nèi),把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉動光量調節(jié)器,使透光度為T=100%,輕輕拉動比色皿座架拉桿,使稀釋精液進入光路,此時表頭指針所示為精液的吸光度A,根據(jù)公式計算精液密度。
二、技術要點
1、輸精
(1)翻肛員用右手握住母雞雙腿,稍提起,左手拇指和食指在腹部施以壓力,使輸卵管外翻,輸精員用輸精槍或輸精管吸取定量稀釋精液大約0.04ml,沿輸卵管口中央進入,感覺無阻力時輕輕插入2-3cm,輕輕下壓輸精槍或擠壓授精滴管,將精液輕輕擠出,注意要防止輸精管觸碰到輸卵管的側壁,避免造成輸卵管損傷。
(2)同時翻肛人員立即解除左手對雞腹部的壓力,防止精液溢出,精液擠出后不要立即放開擠壓,待拔出后再放松,拔出輸精槍或輸精滴管時,關注輸卵管回縮過程,避免帶出精液,如果有精液,要重復輸一次。
2、輸精注意事項
(1)挑選健康、無垂直傳播性病原(雞白痢、禽白血病等)的產(chǎn)蛋母雞,在輸精前7天把不產(chǎn)蛋的母雞挑選出來淘汰或放到標記的籠子中。
(2)為減少母雞損傷,輸精時間應在15:00-17:00點進行。
(3)嚴格遵循抓雞順序,避免漏抓、重抓。
(4)抓雞人員動作要穩(wěn)、準、輕、快,防止動作粗暴給雞帶來損傷。
(5)翻肛前需用沾有消毒液的毛巾擦拭手,翻肛時用力不可過大或過小,以輸卵管口剛好露出泄殖腔為好,如果發(fā)現(xiàn)輸卵管內(nèi)有未產(chǎn)出的雞蛋,可用手擠壓出來,或做好標記,等待雞蛋產(chǎn)出后再輸精,當天已授精的母雞勿再翻肛。
(6)選用口徑適中、管口光滑的輸精管,以保證輸精量的準確,避免刮傷輸卵管、泄殖腔粘膜。
(7)不可反復吹吸精液,避免造成精子大量死亡,每輸完1只雞,都應更換輸精槍頭或用醫(yī)用棉擦拭輸精管口。
3、器具管理
每次授精結束后,及時沖洗采精管、輸精管,沖洗干凈后在170℃下烘烤或煮沸30分鐘,也可以用95%的酒精潤洗后再用生理鹽水沖洗1-2次,滅菌后的采精管、輸精管需在無菌條件下保存?zhèn)溆?,每次輸精結束后將輸精用的移液器調整至最大刻度,并每隔1個月安排專業(yè)人員對移液器進行校準,溫度計每月校正1次。
4、其它注意事項
(1)授精人員的技術水平直接影響到種公雞的射精量和精液品質,所以挑選可靠的采精員,是人工授精工作開展好壞的關鍵,授精員操作嫻熟,掌握采精、輸精技術和技巧,動作要輕而敏捷,工作要細致認真,同時嚴格執(zhí)行操作規(guī)程,才能取得良好的授精效果。
(2)一般同一雞舍的人工授精人員、操作手法必須固定,采精、輸精需有固定的日程、時間,更換人員、操作手法都會引起應激,導致受精率下降,因此人工授精過程中授精人員要配合默契,有利于提高采精質量和受精率,挑出的病殘雞身體狀況恢復正常后,繼續(xù)授精,連續(xù)授精2次后可放回大群中。