回答1、目的：盡可能的保持菌種的原有性狀以及活力的穩(wěn)定，保證菌種不死亡、不發(fā)生變異、不被外物污染，保持菌株的優(yōu)良性狀不發(fā)生退化以及優(yōu)良菌株的存活。2、原理：通過降低微生物體內(nèi)的代謝，抑制生長繁殖，從而延長菌種的生命，減少變異，常用的方法為低溫保藏、缺氧保藏、干燥保藏。

一、菌種保藏的目的

1、目的

在使用和傳代的過程中，菌種容易出現(xiàn)污染，發(fā)生變異，死亡等情況，從而導(dǎo)致菌種衰退，優(yōu)良菌種丟失。而菌種保藏的目的就是為了盡可能的保持菌種的原有性狀以及活力的穩(wěn)定，保證菌種不死亡、不發(fā)生變異、不會(huì)被外物污染，保持菌株的優(yōu)良性狀不發(fā)生退化以及優(yōu)良菌株的存活。

2、原理

菌種保藏的原理是通過降低微生物體內(nèi)的代謝，抑制生長繁殖，從而延長菌種的生命，減少變異。常用的方法主要為低溫保藏，缺氧保藏，干燥保藏。除此之外，避光，添加保護(hù)劑，缺乏營養(yǎng)等也可以提高保藏的效果。

二、菌種保藏的方法有哪些

1、斜面低溫保藏法

將菌種接種到適合的固體斜面培養(yǎng)基上，等到菌種充分生長過后，使用油紙將棉塞部分包扎好，然后轉(zhuǎn)移至2-8℃的冰箱中進(jìn)行保存。

2、液體石蠟保藏法

（1）使用三角燒瓶將液體石蠟裝好，塞上棉塞，并用牛皮紙進(jìn)行包扎，0.1MPa，121.3℃滅菌30分鐘左右，然后轉(zhuǎn)移至40℃的溫箱中，將水汽蒸發(fā)掉。

（2）將菌種在斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到健壯的菌體，然后使用滅菌吸管將石蠟注入斜面上，用量為高出斜面頂端1cm為宜。

（3）將試管直立，放置在低溫或者室溫的環(huán)境下進(jìn)行保存。

3、濾紙保藏法

（1）準(zhǔn)備好濾紙條（0.5×1.2cm），裝入安瓿管中（0.6×8cm），每個(gè)管中放入1-2張，然后塞上棉塞，在0.1MPa，121.3℃的環(huán)境下滅菌30分鐘。

（2）將菌種在斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到健壯的菌體，然后取出1-2ml的滅菌脫脂牛乳，滴加在滅菌培養(yǎng)皿內(nèi)，接著取數(shù)環(huán)菌苔在牛乳內(nèi)混合均勻，制成濃懸液。

（3）使用鑷子將濾紙條夾出，浸入菌懸液內(nèi)，吸飽后，放回安瓿管中，塞上棉塞。

（4）將安瓿管放入裝有五氧化二磷的干燥器，并用真空泵抽氣至干，然后將棉花塞入管內(nèi)，用火焰熔封，放置在低溫下保存。

（5）當(dāng)需要使用菌種的時(shí)候，將安瓿管口在火焰上燒熱，在燒熱的部位滴上一滴冷水，使玻璃破裂，再用鑷子將瓶口端的玻璃敲掉，等到打開安瓿管后，將濾紙取出，放入液體培養(yǎng)基內(nèi)，置溫箱中培養(yǎng)。

4、沙土保藏法

（1）取出河沙，加入10%稀鹽酸，加熱煮沸30分鐘（除去有機(jī)質(zhì)）。

（2）將酸水倒掉，并用自來水將河沙洗至中性，然后進(jìn)行烘干，過篩（40目篩子），將粗顆粒去掉。

（3）取非耕作層的不含腐植質(zhì)的瘦黃土或紅土，浸泡洗滌數(shù)次，直至為中性。

（4）烘干，碾碎，過篩（100目篩子），去除粗顆粒。

（5）將沙和土按照2：1的比例混合，裝入試管中，塞好棉塞，滅菌30分鐘左右。

（6）將菌種在斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到健壯的菌體，然后向斜面培養(yǎng)物中注入3-5ml無菌水，洗下細(xì)胞或孢子制成菌懸液。

（7）用無菌吸管吸取菌懸液，均勻滴入沙土管中，每管0.2-0.5ml，然后真空抽去管中的水分。如果是放線菌和霉菌可以直接挑取孢子拌入沙土管之中。

（8）將沙土管用火焰熔封，然后放置在低溫（4-6℃）干燥處保藏，或者是將沙土管直接用牛皮紙或塑料紙包好，置干燥器內(nèi)保存。保存過程中，需要每隔半年檢查一次菌種的存活性和純度。

5、甘油管保存法

（1）將80%的甘油進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。

（2）將菌種放置在斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后使用無菌水制成高濃度的菌懸液。

（3）使用1ml的甘油與菌液混合均勻，讓甘油的濃度為10-30%左右，然后將其放置在零下70℃的環(huán)境下進(jìn)行凍存。

（4）也可以使用甘油-生理鹽水（體積比8：2），和菌體肉湯混合均勻，然后放置在零下20℃的環(huán)境下進(jìn)行保存。

6、冷凍干燥保藏法

（1）在低溫下將細(xì)胞快速凍結(jié)，然后在真空條件下進(jìn)行干燥，同時(shí)為了保證細(xì)胞在冷凍和水分升華的過程中不受損害，應(yīng)當(dāng)使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞細(xì)胞懸液（菌在凍結(jié)和脫水過程中起到保護(hù)作用的溶質(zhì)），通過氫鍵和離子鍵對水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。

（2）干燥后的菌種在真空下封裝，和空氣隔絕，從而實(shí)現(xiàn)長期保藏。

（3）該方法兼具低溫、干燥、除氧三方面菌種保藏的主要因素，除開絲狀真菌的菌絲體外，其它各類微生物大多都適用。