回答1、將樣本做去皮和去脂處理,并用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,然后稱取適量的均質(zhì)物至離心管內(nèi)。2、依次加入蒸餾水、試劑A、衍生化試劑,振蕩混勻后孵育半小時。3、依次加入試劑B、試劑C、提取劑,并振蕩混勻。4、離心5分鐘,取上層有機(jī)相至離心管內(nèi),再用氮氣吹干。5、用凈化劑溶解干燥物,加入試劑D,離心2分鐘后待檢。
一、雞新城疫抗體檢測步驟
1、將魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等樣本做去皮、去脂肪等處理,再用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,然后稱取3±0.05克均質(zhì)物至15毫升的離心管內(nèi)。
2、依次加入4毫升蒸餾水、0.5毫升試劑A以及0.6毫升衍生化試劑,并振蕩混勻,于65℃水浴中孵育半小時。
3、依次加入1毫升試劑B、0.4毫升試劑C、1瓶4毫升的提取劑,然后振蕩混勻。
4、在室溫下(20-25℃)以4000r/分鐘的速度離心5分鐘,取2毫升上層有機(jī)相至5毫升的離心管內(nèi),在50-60℃水浴中用氮氣(或空氣吹干儀)吹干。
5、取1毫升凈化劑溶解干燥物,再加入0.5毫升試劑D振蕩混勻,在室溫下(20-25℃)以4000r/分鐘的速度離心2分鐘,最后待檢。
6、若使用全血標(biāo)本進(jìn)行檢測,標(biāo)本的移動速度可能較慢,必要時可在加樣1分鐘后,向加樣孔內(nèi)滴入1滴PBS作輔助液,以促進(jìn)標(biāo)本移動。
二、雞新城疫的癥狀表現(xiàn)
1、急性型
(1)病雞呼吸困難,會發(fā)出“咕嚕”的特殊怪聲。
(2)病雞的嘴、鼻中有大量黏液,產(chǎn)蛋量下降。
(3)病雞出現(xiàn)下痢,其糞便的顏色為黃白色或綠色,有麻痹和神經(jīng)癥狀。
2、最急性型
此類癥狀大多出現(xiàn)在3-4周齡的小雞身上,發(fā)病時通常不會表現(xiàn)出任何癥狀,但病發(fā)后小雞會快速死亡。
3、亞急性或慢性型
病雞出現(xiàn)跛行、麻痹、痙攣、運(yùn)動失調(diào)、肌肉抽搐等癥狀,產(chǎn)蛋雞發(fā)病后期產(chǎn)量會有所降低,一般會發(fā)生于成年雞身上。
4、非典型性新城疫
病雞出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難的現(xiàn)象,且伴有分泌物、神經(jīng)癥狀,若蛋雞和種雞發(fā)病,則產(chǎn)蛋量一般會急速降低。